安排别离法简单易行，子孙变异小，能保菌株的优秀特性，它是生产上常用的菌种别离法。种菇应挑选外观典型，巨细适中，菌盖外表鳞片较少，色彩纯白无病虫灾的头潮菇，采摘种菇应在鸡腿菇成长的棒状后期或梭形前期。
母种培育基可挑选PDA培育基，也可用如下配方：小麦600克，鲜子实体100克，葡萄糖20克，蛋白胨3克，磷酸二氢钾0.5克，磷酸氢二钾1克，硫酸镁1克，硫酸钙1克，琼脂25克，水1000 毫升。母种培育基的制造的过程及无菌别离技能同其它食用菌制种技能，不再介绍。
鸡腿菇原种制造多选用麦粒种，其制造办法如下：麦粒浸泡24小时左右，至麦粒露白，用清水冲刷后煮沸20-25分钟，捞出沥干水后加1％石膏粉，20％已破坏的麦秆发酵料，然后装瓶，灭菌、无菌接种与培育。此配方菌丝成长旺盛，成长速度快，在25℃环境下750毫升菌种瓶12-15天可长满瓶。
鸡腿菇培育种培育基多用棉壳、麦秆发酵料制造。配方如下：麦秆牛粪发酵料33%、麸皮10 %、棉籽皮50％、玉米粉5％、石灰2%。先将麦秆破坏中加牛粪20％-30%，加石膏2％，堆积发酵5-6天，然后参加其它质料，发酵48小时即可装袋灭菌，无菌接种与培育。此配方比单纯用发酵料及单纯用棉籽皮有发酵快、菌丝壮的长处。
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